茶氨酸(Theanine)是茶葉的特征氨基酸,也是茶葉呈味物質之一,茶葉存在二十多種氨基酸中,茶氨酸約占茶葉氨基酸總量50%~60%,在鮮葉中茶氨酸含量約占茶葉干重的1~2%。研究表明茶氨酸具有抗氧化、調節免疫、延緩衰老等多種生物活性。
某用戶制得兩種茶葉樣本,希望索萊寶代檢其中茶氨酸的含量,作為評價樣本優劣的指標之一。
茶葉中茶氨酸經沸水加熱提取,凈化處理后,用高效液相色譜儀進行測定,用標準品進行定性和定量。
由于樣本處理與檢測方法無需開發,該樣本收到后次日即得檢測結果,報告于次日發予客戶。
3.1.樣品信息
收到茶葉樣品兩個,a和b。
3.2.材料與方法
所有的溶劑與試劑均為色譜級,茶氨酸標準品選用的是索萊寶產品(ST8430 L-茶氨酸)。
3.3.樣品制備
茶氨酸提取方法
(1)茶葉樣品經磨碎混勻后,稱取1.0g(準確至0.01g)試樣;
(2)加沸蒸餾水,置于100℃的恒溫水浴鍋中浸提30min;
(3)0.45μm水相濾膜過濾,作為代測液備用;
本實驗所用的儀器為高效液相色譜儀,配備紫外檢測器,色譜柱為C18 (250*4.6mm 5μm ),流動相A:純水,流動相B:乙腈,洗脫梯度如下:
茶氨酸標準溶液:
分別將1mg/ml的茶氨酸儲備溶液稀釋為對應濃度的茶氨酸標準使用液。0.45μm水相濾膜過濾。
待流速和柱溫穩定后,進行空白運行,準確吸取一定量茶氨酸標準使用液注射入HPLC,在相同的液相色譜條件下注射同等量測試液,測試液以峰面積定量,由色譜峰的峰面積可以從標準曲線上求出相應的茶氨酸的濃度,測試液中的茶氨酸的響應值均應在儀器測定的線性范圍之內。
X—樣品中茶氨酸的含量,單位為克每千克(g/kg)
c—樣品濃度,單位為毫克每毫升(mg/mL)
V—最后總定容后樣品的體積,單位為毫升(mL)
m—樣品的質量,單位為克(g)
w—樣品的干物質含量(質量分數)%
綜上,可計算出a.b兩個茶葉樣本中,茶氨酸的具體含量。
聲明:該技術服務案例的分享已獲得用戶的同意,并將實驗關鍵信息根據用戶的要求進行了對應刪減。
索萊寶基于自身搭建分析檢測平臺,提供的高效液相色譜技術服務,可以快速、準確的進行物質的定性、定量分析。先進的儀器設備、專業的技術團隊、嚴格的執行標準,保障實驗方案的科學性、穩定性、重復性。
服務項目主要包括:
1) HPLC方法學開發和驗證
2) 物質含量的測定
3) 中藥指紋圖譜研究
4) 藥物(天然產物/原料藥及其雜質)
分離純化
5) 物質結構確定
6) LC/LC-MS/NMR檢測