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技術(shù)文章

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  • 漆酶活性是如何檢測(cè)的?

    2021-03-12 漆酶是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。酶液的提取步驟:1、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(10*個(gè)):提取液體積(ml)為500-1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率30%或300W,超聲3s,間隔7s,總時(shí)間3min),12000g4C離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。2、組織:按照組織質(zhì)量(...
  • ELISA試劑盒里邊包括七個(gè)組分你知道是哪些嗎?

    2021-03-10 我們都知道ELISA試劑盒里邊包括七個(gè)組分,他們分別是:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶符號(hào)的抗原或抗體(聯(lián)絡(luò)物);(3)酶的底物;(4)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參看標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);(5)酶聯(lián)物(聯(lián)絡(luò)物)及標(biāo)本的稀釋液;(6)洗滌液;(7)酶反響停止液。其間三個(gè)是必要的試劑:免疫吸附劑、聯(lián)絡(luò)物和酶的底物等。免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)單調(diào)的條件下一般可保存6個(gè)月以上。有些不無(wú)缺的試盒,僅供應(yīng)包被用...
  • ELISA試劑盒樣本的處理方式和使用注意事項(xiàng)說(shuō)明

    2021-03-10 ELISA試劑盒收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。ELISA試劑盒樣本的處理方式:1、組織提取液、肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆?2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用,胃液、唾液一般采集時(shí)間是空腹采集,一般隔夜尿不采集;3、采集血清時(shí),一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室...
  • FDA水解酶活性檢測(cè)試劑盒的基礎(chǔ)知識(shí)介紹

    2021-03-02 FDA是一種無(wú)色化合物,在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解,并經(jīng)脫水反應(yīng),產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素,穩(wěn)定不易被分解,并在490nm處有強(qiáng)吸收峰,通過(guò)檢測(cè)490nm處的吸光值變化可計(jì)算得FDA水解酶活性。FDA水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化,是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。FDA水解酶活性的計(jì)算公式為:FDA活性(U/g土樣)=(△A÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品)×V反總÷W÷T=14.4×(△A÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))÷WC標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度2μm...
  • 教你成為平淡無(wú)奇的WB小能手—凝膠制備

    2021-02-26 WB實(shí)驗(yàn)流程●樣本采集保存,蛋白提取相關(guān)知識(shí),請(qǐng)●蛋白定量和蛋白變性相關(guān)知識(shí),請(qǐng)現(xiàn)在正式進(jìn)入跑膠環(huán)節(jié),這一次,讓小編帶您總結(jié)一下制膠相關(guān)的知識(shí)點(diǎn):SDS-凝膠電泳系統(tǒng)采用的是不連續(xù)性系統(tǒng),上層為濃縮膠(或積層膠),下層為分離膠,先配制分離膠,濃縮膠pH6.8,可以通過(guò)甘氨酸和和氯離子之間形成的電壓對(duì)蛋白樣品產(chǎn)生壓縮,從而使蛋白樣品壓成一條狹窄的條帶,處于同一條線(xiàn)上;分離膠pH8.8,與甘氨酸的pka接近,從而使不同分子量的蛋白產(chǎn)生不同的泳動(dòng)速度,從而使不同分子量的蛋白分開(kāi)。分...
  • 乙酰膽堿酯酶測(cè)定試劑盒的測(cè)定原理是什么?

    2021-02-04 乙酰膽堿酯酶(AChE)是可將神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿(ACh)水解為乙酸和膽堿的一類(lèi)酶。AChE位于突觸間隙中,通過(guò)降解ACh來(lái)終止突觸傳遞,從而使得膽堿神經(jīng)元在激活后回復(fù)到靜息狀態(tài)。AchE活性的改變可能是由于在某些種類(lèi)的殺蟲(chóng)劑條件下暴露所造成的,在這時(shí)候這些殺蟲(chóng)劑起到了膽堿酯酶抑制劑的作用。AChE的抑制劑也可用于治療如癡呆在內(nèi)的某些疾病。乙酰膽堿酯酶測(cè)定試劑盒具有測(cè)量敏感、準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn),只需加入單一反應(yīng)試劑,然后室溫下分別在反應(yīng)后的2分鐘和10分鐘讀取儀器數(shù)據(jù)即可。可...
  • 教你成為平淡無(wú)奇的WB實(shí)驗(yàn)小能手—樣本制備篇(續(xù))

    2021-01-29 WB實(shí)驗(yàn)流程樣本制備的步驟關(guān)于樣本采集和保存,蛋白提取的相關(guān)知識(shí)和技巧請(qǐng)查看:接下來(lái),讓小編帶您總結(jié)關(guān)于蛋白定量和蛋白變性相關(guān)的知識(shí)點(diǎn):一蛋白定量測(cè)定蛋白常用的方法有Bicinchoninicacid(BCA)法、Lowry法和Bradford法(考染法)1.BCA法的測(cè)定原理是蛋白質(zhì)將銅離子還原成亞銅離子,后者在堿性溶液中與BCA結(jié)合生成紫紅色結(jié)合物,該復(fù)合物在562nm處有吸光值且與蛋白質(zhì)濃度成正相關(guān)性,據(jù)此可測(cè)定蛋白質(zhì)濃度。考馬斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488...
  • 定位重塑型納米凝膠介導(dǎo)共遞送抗血管藥物自噬抑制劑,實(shí)現(xiàn)腫瘤的協(xié)同治療

    2021-01-29 腫瘤是一種復(fù)雜難治的疾病,對(duì)人類(lèi)健康存在重大威脅。當(dāng)腫瘤體積超過(guò)2-3mm3時(shí),腫瘤的增殖、轉(zhuǎn)移與擴(kuò)散主要依靠自身的血管系統(tǒng)來(lái)提供必要的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。而在缺乏血管的情況下,腫瘤具有自限性生長(zhǎng)的特點(diǎn)。因此,將腫瘤血管作為靶點(diǎn),抑制它的形成或破壞其存在,直接切斷腫瘤增殖與轉(zhuǎn)移的營(yíng)養(yǎng)通道,是一個(gè)有吸引力的治療策略。目前,根據(jù)作用機(jī)制的不同,血管靶向藥物(VTAs)主要包括兩大類(lèi):血管生成抑制劑(AIs)和血管阻斷劑(VDAs)。在VDAs中,康普瑞汀(CA4)作為常用的小分子血管...
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